Testy biologiczne umozliwiajace ocene szkodliwosci roznych czynnikow w komorkach ssakow

  1. Testy umozliwiajace wstepna, szybka ocene szkodliwosci roznych czynnikow
    1. Ocena przezywalnosci limfoblastow L5178Y-R lub L5178Y-S jako miary cytotoksycznosci
      Test pozwala na ocene przezywalnosci mysich komorek bialaczkowych poddanych dzialaniu roznych czynnikow.
    2. Ocena kinetyki wzrostu limfoblastow L5178Y-R lub L5178Y-S jako miary cytotoksycznosci
      Test pozwala na ocene tempa podzialow komorkowych in vitro w obecnosci roznych substancji.
    3. Wlaczanie 3H-tymidyny do limfocytow ludzkich stymulowanych fitohemaglutynina
      Test umozliwia ocene szybkosci syntezy DNA oraz zdolnosci do naprawy uszkodzonego materialu genetycznego.

  2. Testy umozliwiajace zbadanie uszkodzen materialu genetycznego komorek ssakow in vivo i in vitro wywolanych przez rozne zwiazki chemiczne i czynniki zanieczyszczajace srodowisko naturalne
    1. Oznaczenie czestosci tworzenia mikrojader
      Test jest wykonywany na hodowlach limfocytow ludzkich. Pozwala on na ocene czestosci tworzenia mikrojared w wyniku uszkodzenia chromosomow.
    2. Oznaczanie czestosci indukcji aberracji chromosomowych
      Test umozliwia bezposrednia ocene czestosci indukcji i rodzaje uszkodzen chromosomow in vitro i in vivo.
    3. Oznaczenie uszkodzen DNA metoda kometkowa
      Metoda ta (polegajaca na elektroforezie zelowej pojedynczych komorek i oznaczeniu ilosci DNA w "ogonie kometki" bada sie stan DNA limfocytow krwi obwodowej. Stosujac odpowiednie enzymy, mozna nia takze oznaczyc okreslone uszkodzenia zasad azotowych DNA, np. uszkodzenia oksydacyjne.
    Rys.2. Komórka z uszkodzonym DNA; widoczny "ogon kometki" z rozluznionych petli DNA przemieszczonych w polu elektrycznym.
    Rys.1. Komórka kontrolna (nieuszkodzony DNA).
  3. Testy pozwalajace na ocene mutagennego dzialania substancji stalych, cieklych lub gazowych na komorki ssakow rosnace in vitro
    Metoda polega na inkubacji komorek w obecnosci czynnika mutagennego, a nastepnie klonowaniu ich na podlozu selekcjonujacym.
    1. Wykrywanie mutacji w locus tk (kinaza tymidynowa)
    2. Wykrywanie mutacji w locus hgprt (fosforybozylotransferaza hipoksantyna: guanina)
English